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小容量搖瓶機(jī)在菌種培養(yǎng)中的使用方法

更新時(shí)間:2017-07-25    點(diǎn)擊次數(shù):1227
     在進(jìn)行小容量搖瓶機(jī)試驗(yàn)前,首先檢查小容量搖瓶機(jī)各部件,檢查氣源、電源、管路、壓力表、密封等是否正常,要求實(shí)驗(yàn)人員在操作前必須對(duì)小容量搖瓶機(jī)的各個(gè)按鈕,流程熟練掌握,詳細(xì)閱讀搖瓶機(jī)說(shuō)明書(shū),及實(shí)驗(yàn)室儀器安全操作規(guī)程。掌握了小容量搖瓶機(jī)的基本操作要領(lǐng)后,逐步按以下步驟進(jìn)行搖瓶機(jī)細(xì)菌培養(yǎng)試驗(yàn):    
 
1、小容量搖瓶機(jī)復(fù)蘇:
 
   根據(jù)所培養(yǎng)的細(xì)菌選擇適宜的培養(yǎng)基,大部分細(xì)菌在LB培養(yǎng)基中在超凈工作臺(tái)先用1毫升左右的適宜的培養(yǎng)基溶解冷凍菌,然后轉(zhuǎn)移到10毫升中試管(放入4毫升液體培養(yǎng)基)中,一般在37攝氏度搖床靜止或低轉(zhuǎn)速培養(yǎng)12小時(shí)或者過(guò)夜(溫度取決于所培養(yǎng)的細(xì)菌適宜生長(zhǎng)的溫度)。    
 
2、搖瓶機(jī)平板劃線培養(yǎng):
 
   在平板(瓊脂+液體培養(yǎng)基)劃線,放37攝氏度培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)6小時(shí)~12小時(shí),在平板上觀察是否形成了單菌落。
 
3、小容量搖瓶機(jī)挑單菌落:
 
   在超凈臺(tái)中挑選典型單菌落,置入10毫升中試管(內(nèi)有5毫升液體培養(yǎng)基)中,在37攝氏度搖床,轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)培養(yǎng)12小時(shí)或者過(guò)夜,肉眼能看到試管渾濁。  
 
4、小容量搖瓶機(jī)按照1:20的比例將中試管中的菌液移到250毫升三角瓶(放入100毫升液體培養(yǎng)基),培養(yǎng)條件同前。注意:所有的接種操作均需要在層流罩中,培養(yǎng)基應(yīng)無(wú)菌。

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